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A431 細胞を，EGF刺激した後の細胞内Erk1/2のリン酸化状態の変化を
Zn2+–Phos-tag SDS-PAGEで調べています。
Egf刺激後に，Erk1/2(42/44kDa)それぞれのErkから
３種類のリン酸化バンドが派生します。
どちらから派生したのか調べるために，２D解析をしたのが一番左の図です。
3種のリン酸化バンドはいずれもErk1とErk2がほぼ同じ移動度のため
重なっているものであることがわかりました。
Erk1/2の３種類のリン酸化種を抗リン酸化抗体で同定しました。
一番上は，pT202/Y204
上から２番目は，pY204
上から３番目は，pT202
でした。
１箇所リン酸化したものは，活性化の後Phosphataseの働きで
脱リン酸化していく過程の産物であると考えられます。
活性化型Erk1/2であるpT202/Y204は，数分後にピークに達し，
その後速やかに消失しますが，
pY204は120分後にも残っています。
活性化は数分のうちに行われる速やかな応答ですが，
その後時間をかけて元の状態に戻るのではないかと考えられます。
それは，細胞がむやみやたらに増殖刺激に応答しないための
負の制御機構のようなものではないかと推測しています。